氯霉素(Chloramphenicol)屬于應用廣泛的抗菌素,但其存在嚴(yan)重的副(fu)作(zuo)用,能引起人的再生(sheng)障(zhang)礙(ai)性貧血,粒(li)細胞缺乏癥等疾病。
本(ben)試劑盒是應(ying)用(yong)ELISA技術研(yan)發的藥物殘留檢測產(chan)品(pin),具有快(kuai)速、簡(jian)便(bian)、準確和(he)靈敏度高等優點,操作時間需45min,能減少操作誤差和(he)工作強度。
1、將所(suo)需(xu)試劑(ji)從冷藏環境中取(qu)出,置于室溫(20~25℃)平衡30min以上(shang),注意每種液(ye)體試劑(ji)使用(yong)前均須(xu)搖勻(yun)。
2、取出(chu)需要數量的微(wei)孔(kong)板,將不(bu)用的微(wei)孔(kong)板放進原錫箔袋中(zhong)并且與提供的干燥(zao)劑一(yi)起重新(xin)密(mi)封(feng),保存于(yu)2~8℃。切(qie)勿冷凍。
3、洗(xi)滌液【配(pei)液1】在使用前也需(xu)回(hui)溫。
4、編(bian)號:將樣本(ben)(ben)/標準(zhun)(zhun)品對應微孔按序(xu)編(bian)號,并記錄標準(zhun)(zhun)孔和樣本(ben)(ben)孔所在的位置(zhi)。
5、加標(biao)準品/樣本:加入標(biao)準品或樣本50μL到(dao)對應(ying)的微(wei)孔(kong)(kong)中,再加入氯(lv)霉素酶標(biao)物50μL/孔(kong)(kong),再加入氯(lv)霉素抗試劑50μL/孔(kong)(kong),輕(qing)輕(qing)振蕩混勻,用蓋板(ban)膜蓋板(ban)后置(zhi)于25℃避(bi)光環境中反(fan)應(ying)30min。
6、洗(xi)板(ban):小心揭(jie)開(kai)蓋板(ban)膜,將孔(kong)內(nei)液體(ti)甩(shuai)干,用洗(xi)滌液【配液1】250μL/孔(kong),充分(fen)洗(xi)滌4~5次,每(mei)次間(jian)隔(ge)10s,用吸水紙拍干(拍干后未(wei)被清(qing)除的(de)氣泡可用未(wei)使(shi)用過的(de)槍頭破)。
7、顯(xian)色:加入底物(wu)液A液50μL/孔,再加底物(wu)液B液50μL/孔,輕輕振蕩(dang)混勻,用蓋板膜蓋板后置于25℃避光環境中反應15min。
8、測(ce)定(ding)(ding):加(jia)入終止(zhi)液(ye)(ye)50μL/孔(kong),輕輕振蕩混勻,設定(ding)(ding)酶標儀于450nm處(建(jian)議用(yong)雙波長450/630nm檢(jian)測(ce),請在5min內(nei)讀完數據),測(ce)定(ding)(ding)每孔(kong)OD值(若無酶標儀,則(ze)不加(jia)終止(zhi)液(ye)(ye)用(yong)目測(ce)法可(ke)進行判定(ding)(ding))。