硝(xiao)(xiao)基(ji)呋(fu)喃(nan)(nan)(nan)(nan)類(lei)藥(yao)(yao)物(wu)(wu)(wu)(wu)是一(yi)種抗(kang)生素，對(dui)大(da)(da)多數革蘭氏(shi)陽(yang)性(xing)菌(jun)和(he)革蘭氏(shi)陰性(xing)菌(jun)等病原體(ti)(ti)均有殺滅作用(yong)(yong)。硝(xiao)(xiao)基(ji)呋(fu)喃(nan)(nan)(nan)(nan)類(lei)藥(yao)(yao)物(wu)(wu)(wu)(wu)因為價格(ge)較低且(qie)效果好，被廣泛應(ying)用(yong)(yong)于畜禽及水產養(yang)殖(zhi)業，以治療(liao)由大(da)(da)腸桿菌(jun)或沙(sha)門氏(shi)菌(jun)所引起(qi)的腸炎(yan)、疥(jie)瘡(chuang)、赤(chi)鰭病、潰瘍病等。由于硝(xiao)(xiao)基(ji)呋(fu)喃(nan)(nan)(nan)(nan)類(lei)藥(yao)(yao)物(wu)(wu)(wu)(wu)及其代(dai)(dai)謝(xie)物(wu)(wu)(wu)(wu)對(dui)人體(ti)(ti)有致(zhi)癌、致(zhi)畸胎的副作用(yong)(yong)，中華(hua)人民共和(he)國農業部將(jiang)硝(xiao)(xiao)基(ji)呋(fu)喃(nan)(nan)(nan)(nan)類(lei)藥(yao)(yao)物(wu)(wu)(wu)(wu)列為在(zai)飼(si)養(yang)過(guo)程(cheng)中禁止使(shi)用(yong)(yong)的藥(yao)(yao)物(wu)(wu)(wu)(wu)，在(zai)動物(wu)(wu)(wu)(wu)性(xing)食(shi)品(pin)中不得(de)檢出。硝(xiao)(xiao)基(ji)呋(fu)喃(nan)(nan)(nan)(nan)類(lei)原型藥(yao)(yao)在(zai)生物(wu)(wu)(wu)(wu)體(ti)(ti)內代(dai)(dai)謝(xie)迅速，其代(dai)(dai)謝(xie)產物(wu)(wu)(wu)(wu)分別為AOZ、AMOZ、AHD、SEM，和(he)蛋白(bai)質結合而相當穩定，故(gu)常(chang)利用(yong)(yong)代(dai)(dai)謝(xie)物(wu)(wu)(wu)(wu)的檢測來反應(ying)硝(xiao)(xiao)基(ji)呋(fu)喃(nan)(nan)(nan)(nan)類(lei)藥(yao)(yao)物(wu)(wu)(wu)(wu)的殘留狀(zhuang)況。
本試劑(ji)盒是應用ELISA技術研發的(de)藥物殘留(liu)檢測產(chan)品，與(yu)儀(yi)器分析(xi)技術相比具有快(kuai)速、簡便、靈(ling)敏度高等優(you)點，能減少工作強度。
1、將所需試(shi)劑從冷(leng)藏環(huan)境(jing)中取出，置(zhi)于室溫（20～25℃）平(ping)衡30min以(yi)上，注意每種液體試(shi)劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數量(liang)的微孔板，將不(bu)用的微孔板放進原(yuan)錫箔(bo)袋(dai)中并且與提供的干燥(zao)劑一起重新密封，保存于2～8℃。切(qie)勿(wu)冷凍。
3、洗滌液【配液1】在(zai)使用前也需回溫。
4、編號：將樣本(ben)和(he)標(biao)準(zhun)(zhun)品對應微孔按序編號，每個樣本(ben)和(he)標(biao)準(zhun)(zhun)品做(zuo)2孔平行，并記錄標(biao)準(zhun)(zhun)孔和(he)樣本(ben)孔所在(zai)的位置。
5、加(jia)標準品(pin)/樣本(ben)(ben)：加(jia)標準品(pin)或樣本(ben)(ben)50μL/孔到對應的微孔中(zhong)，再加(jia)入呋喃唑(zuo)酮(tong)(tong)代謝(xie)物(wu)(wu)酶標物(wu)(wu)50μL/孔，然(ran)后(hou)再加(jia)入呋喃唑(zuo)酮(tong)(tong)代謝(xie)物(wu)(wu)抗(kang)試劑50μL/孔輕輕振(zhen)蕩混勻，用蓋板膜蓋板后(hou)置于25℃避光環境中(zhong)反應30min。
6、洗板：小心揭開蓋板膜，將(jiang)孔(kong)內液體甩(shuai)干(gan)，用洗滌液【配液1】250μL/孔(kong)，充分洗滌4~5次，每次間隔10s，用吸水紙拍(pai)干(gan)（拍(pai)干(gan)后未(wei)被清除(chu)的氣泡可用未(wei)使用過的槍頭戳破）。
7、顯色：加入底物(wu)液(ye)(ye)A液(ye)(ye)50μL/孔(kong)，再(zai)加底物(wu)液(ye)(ye)B液(ye)(ye)50μL/孔(kong)，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后(hou)置于25℃避光(guang)環(huan)境中反應15min。
8、測定：加(jia)入終止液50μL/孔(kong)(kong)，輕輕振(zhen)蕩(dang)混勻，設定酶標(biao)儀于450nm處(chu)（建議用雙波長450/630nm檢測，請(qing)在5min內讀完數據(ju)），測定每孔(kong)(kong)OD值(zhi)(若無酶標(biao)儀，則不加(jia)終止液用目測法可進行(xing)判定)。
