硝(xiao)(xiao)基(ji)(ji)呋(fu)(fu)(fu)喃(nan)類藥(yao)(yao)物是一種抗(kang)生素，對(dui)大多數革蘭氏陽性菌(jun)和(he)(he)革蘭氏陰性菌(jun)等(deng)(deng)病(bing)原(yuan)(yuan)體均有殺滅作用(yong)。硝(xiao)(xiao)基(ji)(ji)呋(fu)(fu)(fu)喃(nan)類藥(yao)(yao)物因為價格較(jiao)低且(qie)效果好，被廣泛應用(yong)于畜禽及(ji)水產養(yang)殖業(ye)，以治療由大腸(chang)桿菌(jun)或沙門氏菌(jun)所(suo)引起的(de)腸(chang)炎、疥(jie)瘡、赤鰭病(bing)、潰瘍(yang)病(bing)等(deng)(deng)。由于硝(xiao)(xiao)基(ji)(ji)呋(fu)(fu)(fu)喃(nan)類藥(yao)(yao)物及(ji)其代謝(xie)物對(dui)人體有致(zhi)癌、致(zhi)畸胎的(de)副作用(yong)，中(zhong)華人民共和(he)(he)國(guo)農業(ye)部將硝(xiao)(xiao)基(ji)(ji)呋(fu)(fu)(fu)喃(nan)類藥(yao)(yao)物列為在(zai)(zai)飼養(yang)過程(cheng)中(zhong)禁止(zhi)使用(yong)的(de)藥(yao)(yao)物，在(zai)(zai)動物性食(shi)品中(zhong)不得檢出。硝(xiao)(xiao)基(ji)(ji)呋(fu)(fu)(fu)喃(nan)類原(yuan)(yuan)型藥(yao)(yao)在(zai)(zai)生物體內代謝(xie)迅速(su)，其代謝(xie)產物分別為AOZ、AMOZ、AHD、SEM，和(he)(he)蛋白質(zhi)結合(he)而相當穩定(ding)，故常(chang)利用(yong)代謝(xie)物的(de)檢測(ce)來反(fan)應硝(xiao)(xiao)基(ji)(ji)呋(fu)(fu)(fu)喃(nan)類藥(yao)(yao)物的(de)殘留狀(zhuang)況。
本試劑盒(he)是應用ELISA技(ji)術研發的藥物殘留檢測產品，與儀器分(fen)析(xi)技(ji)術相(xiang)比具(ju)有(you)快速、簡便、靈敏度高等優點，能減少工作強度。
1、將所需試(shi)劑從冷藏環境中取出，置于室溫（20～25℃）平衡30min以上，注意(yi)每種液體試(shi)劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數量的微孔板，將(jiang)不用(yong)的微孔板放進原錫(xi)箔袋中并且(qie)與提(ti)供的干燥劑(ji)一起(qi)重新密封，保存于2～8℃。切勿冷凍。
3、洗滌液【配液1】在使(shi)用(yong)前也需(xu)回(hui)溫(wen)。
4、編號(hao)：將樣本(ben)(ben)和(he)標準品(pin)對應微孔(kong)按(an)序(xu)編號(hao)，每個(ge)樣本(ben)(ben)和(he)標準品(pin)做2孔(kong)平行，并記錄標準孔(kong)和(he)樣本(ben)(ben)孔(kong)所在(zai)的位置(zhi)。
5、加標準(zhun)品/樣本：加標準(zhun)品或樣本50μL/孔到(dao)對(dui)應(ying)的微(wei)孔中，再(zai)(zai)加入呋(fu)喃它(ta)酮(tong)代(dai)謝(xie)物酶標物50μL/孔，然后再(zai)(zai)加入呋(fu)喃它(ta)酮(tong)代(dai)謝(xie)物抗試劑50μL/孔輕(qing)輕(qing)振蕩混勻，用蓋(gai)板(ban)膜蓋(gai)板(ban)后置于25℃避光環境(jing)中反應(ying)30min。
6、洗(xi)板：小心揭開蓋(gai)板膜，將孔內液(ye)體(ti)甩干(gan)，用洗(xi)滌液(ye)【配液(ye)1】250μL/孔，充(chong)分洗(xi)滌4~5次，每次間隔(ge)10s，用吸水紙拍干(gan)（拍干(gan)后未(wei)被清除的氣泡可用未(wei)使用過的槍頭戳破(po)）。
7、顯色：加入底物(wu)液A液50μL/孔(kong)，再加底物(wu)液B液50μL/孔(kong)，輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)振(zhen)蕩混勻，用蓋板(ban)膜蓋板(ban)后置于25℃避(bi)光環境中(zhong)反應15min。
8、測(ce)定：加(jia)入(ru)終止液(ye)50μL/孔(kong)(kong)，輕(qing)輕(qing)振蕩混勻，設(she)定酶(mei)標儀于(yu)450nm處（建議用(yong)雙波(bo)長450/630nm檢測(ce)，請在5min內(nei)讀完(wan)數據(ju)），測(ce)定每孔(kong)(kong)OD值(若(ruo)無酶(mei)標儀，則不(bu)加(jia)終止液(ye)用(yong)目測(ce)法(fa)可進(jin)行判(pan)定)。
