硝(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)基呋(fu)喃(nan)(nan)類(lei)藥(yao)(yao)物(wu)(wu)是一種抗生素，對大多數革(ge)蘭氏(shi)陽性(xing)菌(jun)和革(ge)蘭氏(shi)陰(yin)性(xing)菌(jun)等病原(yuan)(yuan)體均有殺滅作用(yong)。硝(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)基呋(fu)喃(nan)(nan)類(lei)藥(yao)(yao)物(wu)(wu)因為價格較(jiao)低(di)且效果好(hao)，被廣(guang)泛應用(yong)于(yu)畜禽及水產養(yang)殖業，以治(zhi)療由大腸(chang)桿菌(jun)或沙門氏(shi)菌(jun)所引起的腸(chang)炎(yan)、疥瘡、赤鰭(qi)病、潰瘍病等。由于(yu)硝(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)基呋(fu)喃(nan)(nan)類(lei)藥(yao)(yao)物(wu)(wu)及其代(dai)謝(xie)物(wu)(wu)對人(ren)體有致癌、致畸胎的副作用(yong)，中(zhong)華(hua)人(ren)民共和國農業部將硝(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)基呋(fu)喃(nan)(nan)類(lei)藥(yao)(yao)物(wu)(wu)列為在(zai)(zai)飼養(yang)過程中(zhong)禁止(zhi)使用(yong)的藥(yao)(yao)物(wu)(wu)，在(zai)(zai)動物(wu)(wu)性(xing)食品中(zhong)不得檢出。硝(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)基呋(fu)喃(nan)(nan)類(lei)原(yuan)(yuan)型藥(yao)(yao)在(zai)(zai)生物(wu)(wu)體內代(dai)謝(xie)迅(xun)速，其代(dai)謝(xie)產物(wu)(wu)分別為AOZ、AMOZ、AHD、SEM，和蛋白質結(jie)合而相(xiang)當穩定，故常利用(yong)代(dai)謝(xie)物(wu)(wu)的檢測來反應硝(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)基呋(fu)喃(nan)(nan)類(lei)藥(yao)(yao)物(wu)(wu)的殘留狀況。
本試劑盒是(shi)應用(yong)ELISA技(ji)(ji)術研發的(de)藥物殘(can)留檢(jian)測(ce)產(chan)品(pin)，與(yu)儀器分析技(ji)(ji)術相比具有快速、簡便(bian)、靈敏度高等優點，能(neng)減少工作強度。
1、將所需(xu)試劑(ji)從(cong)冷藏(zang)環境中(zhong)取出，置于(yu)室溫（20～25℃）平(ping)衡30min以上，注意(yi)每(mei)種液(ye)體試劑(ji)使用(yong)前均(jun)須搖勻。
2、取出需要數(shu)量的微孔(kong)板(ban)，將不用(yong)的微孔(kong)板(ban)放進原錫箔袋中并且與(yu)提供的干燥劑一起重新密(mi)封，保存于2～8℃。切勿冷凍(dong)。
3、洗滌(di)液(ye)【配(pei)液(ye)1】在使用前也需回溫。
4、編(bian)號：將樣本和標(biao)準(zhun)品(pin)對應(ying)微(wei)孔(kong)按序(xu)編(bian)號，每個(ge)樣本和標(biao)準(zhun)品(pin)做2孔(kong)平行，并記錄標(biao)準(zhun)孔(kong)和樣本孔(kong)所在的位(wei)置(zhi)。
5、加標準品(pin)/樣(yang)本：加標準品(pin)或樣(yang)本50μL/孔到對應的微(wei)孔中，再(zai)加入呋(fu)喃(nan)西林代謝物酶標物50μL/孔，然后再(zai)加入呋(fu)喃(nan)西林代謝物抗試劑(ji)50μL/孔輕(qing)輕(qing)振蕩混勻，用蓋板(ban)膜蓋板(ban)后置于25℃避光環境中反應30min。
6、洗板(ban)：小心(xin)揭開(kai)蓋板(ban)膜，將孔內液體甩干(gan)，用洗滌液【配液1】250μL/孔，充(chong)分洗滌4~5次，每次間隔(ge)10s，用吸(xi)水紙拍(pai)干(gan)（拍(pai)干(gan)后(hou)未(wei)被(bei)清(qing)除的(de)(de)氣泡可用未(wei)使用過的(de)(de)槍頭戳破(po)）。
7、顯色：加入底物液A液50μL/孔，再加底物液B液50μL/孔，輕(qing)輕(qing)振蕩(dang)混勻，用(yong)蓋板膜(mo)蓋板后置于25℃避光環(huan)境中反(fan)應(ying)15min。
8、測(ce)(ce)定(ding)(ding)：加入終(zhong)止液(ye)50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設定(ding)(ding)酶(mei)標儀(yi)于(yu)450nm處（建議用雙波長450/630nm檢測(ce)(ce)，請(qing)在5min內讀完(wan)數(shu)據），測(ce)(ce)定(ding)(ding)每(mei)孔OD值(若無酶(mei)標儀(yi)，則不(bu)加終(zhong)止液(ye)用目測(ce)(ce)法可進行判(pan)定(ding)(ding))。
