喹諾酮類(lei)(QNs),又稱為吡(bi)酮酸類(lei)或吡(bi)啶酮酸類(lei),是一類(lei)重要的廣譜抗生素藥物,能夠(gou)抑制(zhi)細菌DNA螺旋酶,常被(bei)作為抗感染藥物在(zai)水產畜禽養殖(zhi)中使用。由(you)于其(qi)存在(zai)耐藥性和潛在(zai)致癌性,世界各國對其(qi)部分藥物的限量值(MRL)作了明確規定(ding)。
本試劑盒是應用(yong)ELISA技術研發的新一代藥物(wu)殘留檢測產(chan)品,與儀器分(fen)析技術相比(bi)具(ju)有(you)快速、簡便、靈敏度高等(deng)優點,能減少工作強度。
1、將所需試劑從冷(leng)藏環境中取出,置于室溫(20~25℃)回(hui)溫30min以上,注(zhu)意每種(zhong)液體(ti)試劑使用前(qian)均需輕輕搖(yao)勻。
2、取出需要數量的(de)微(wei)孔板,將不用的(de)微(wei)孔板放進(jin)原錫箔(bo)袋中并(bing)且與提供的(de)干燥劑一(yi)起重新密封,保存于(yu)2~8℃。切勿冷(leng)凍。
3、洗滌液(ye)(配液(ye)1)在使用前也(ye)需回溫(wen)。
4、編號(hao):將樣(yang)本和(he)標準品(pin)對應(ying)微孔(kong)(kong)(kong)按序(xu)編號(hao),每個樣(yang)本和(he)標準品(pin)做2孔(kong)(kong)(kong)平行,并(bing)記(ji)錄(lu)標準孔(kong)(kong)(kong)和(he)樣(yang)本孔(kong)(kong)(kong)所在的位置。
5、加標(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)/樣本(ben):加標(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)或樣本(ben)50μL到(dao)對應的微孔中(zhong),然后加入(ru)喹諾酮類酶標(biao)物50μL/孔,最后加入(ru)喹諾酮類抗試劑50μL/孔,輕輕振(zhen)蕩混勻,用(yong)蓋板膜蓋板后置于25℃
避(bi)光環境(jing)中反應30min。
6、洗板:小(xiao)心揭(jie)開蓋板膜(mo),將孔內液(ye)體甩干(gan),用(yong)洗滌液(ye)(配液(ye)1)250μL/孔,充分洗滌4~5次(ci),每次(ci)間隔10s,用(yong)吸水紙拍(pai)干(gan)(拍(pai)干(gan)后若有氣泡,可用(yong)未使用(yong)過的槍頭戳(chuo)破)。
7、顯(xian)色:加入底物液A液50μL/孔(kong),再加底物液B液50μL/孔(kong),輕輕振蕩混勻(yun),用蓋(gai)板膜蓋(gai)板后置(zhi)于25℃避光環境中反應15min。
8、測(ce)定(ding):加(jia)入終止液50μL/孔(kong),輕(qing)輕(qing)振蕩混勻。設定(ding)酶標(biao)儀于450nm處(建(jian)議用雙(shuang)波長450/630nm檢測(ce),請在5min內(nei)讀完(wan)數據),測(ce)定(ding)每孔(kong)OD值(若無(wu)酶標(biao)儀,則(ze)不(bu)加(jia)終止液用
目(mu)測法(fa)可進行判(pan)定(ding))。