磺(huang)胺(an)(an)類(lei)(SAs)藥物(wu)在水產畜禽養殖中應用十分廣泛(fan),主要在動物(wu)疾病防治方面(mian)有顯(xian)著(zhu)的(de)療效,但與此同時,這類(lei)藥物(wu)顯(xian)著(zhu)的(de)毒副作用也引(yin)起(qi)了人們(men)的(de)廣泛(fan)關注。例如(ru):影響泌尿(niao)系統功(gong)能,引(yin)起(qi)結(jie)晶尿(niao),血尿(niao)等反應及(ji)致癌性(xing)。因(yin)此國內外對動物(wu)性(xing)食品中磺(huang)胺(an)(an)類(lei)藥物(wu)以及(ji)單(dan)一磺(huang)胺(an)(an)藥物(wu)的(de)殘留(liu)限量都(dou)做出(chu)了相應的(de)規(gui)定。
本試劑盒是應用(yong)ELISA技(ji)術研(yan)發的(de)藥(yao)物殘(can)留檢測產品,具有快(kuai)速、簡(jian)便和靈敏度(du)高等優點,操作(zuo)時(shi)間(jian)需45min,能(neng)減少(shao)檢測時(shi)間(jian)和操作(zuo)誤差。
1、將(jiang)所需試劑(ji)從(cong)冷藏環境中取出,置于室溫(20~25℃)平衡(heng)30min以(yi)上,注(zhu)意每種液體試劑(ji)使用前均須搖勻。
2、取出需要(yao)數(shu)量的(de)微孔(kong)板,將(jiang)不用的(de)微孔(kong)板放進原錫箔袋中并(bing)且與提供的(de)干燥(zao)劑一起重(zhong)新(xin)密封,保存于2~8℃。切勿冷凍(dong)。
3、洗滌液【配(pei)液1】在使用前也需回溫。
4、編(bian)號:將樣本和(he)標準(zhun)品對應(ying)微孔(kong)(kong)(kong)按序編(bian)號,每個樣本和(he)標準(zhun)品做2孔(kong)(kong)(kong)平行,并(bing)記(ji)錄(lu)標準(zhun)孔(kong)(kong)(kong)和(he)樣本孔(kong)(kong)(kong)所在的(de)位置。
5、加(jia)標準(zhun)品(pin)(pin)/樣(yang)(yang)本(ben):加(jia)標準(zhun)品(pin)(pin)或樣(yang)(yang)本(ben)50μL/孔到對應的微孔中(zhong),再(zai)(zai)加(jia)入磺胺類多殘(can)留酶標物50μL/孔,再(zai)(zai)加(jia)入磺胺類多殘(can)留抗試劑50μL/孔,輕輕振(zhen)蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于25℃???避光環境中(zhong)反應30min。
6、洗(xi)板:小心揭開蓋(gai)板膜(mo),將孔(kong)內液(ye)體甩干,用洗(xi)滌液(ye)【配液(ye)1】250μL/孔(kong),充分洗(xi)滌4~5次,每次間(jian)隔10s,用吸水(shui)紙拍干(拍干后未(wei)被清除的(de)氣泡可用未(wei)使用過的(de)槍頭戳破)。
7、顯色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩混勻,用蓋板(ban)膜蓋板(ban)后置于25℃避光環境中(zhong)反應15min。
8、測(ce)定(ding):加入終(zhong)止液(ye)50μL/孔,輕(qing)輕(qing)振蕩混勻,設(she)定(ding)酶標(biao)儀于450nm處(chu)(建議用雙波長450/630nm檢測(ce),請在5min內讀完數據),測(ce)定(ding)每孔OD值(若無酶標(biao)儀,則不加終(zhong)
止液(ye)用目測法可進行判定(ding))。