概要
林(lin)可(ke)霉(mei)素(su)屬于(yu)(yu)林(lin)可(ke)胺類(lei)窄譜抗生素(su)，能(neng)抑(yi)制細菌蛋白質的(de) 合成，細菌對本(ben)(ben)品(pin)以(yi)及其(qi)他大環內酯類(lei)抗菌藥有(you)部分交叉耐藥 性(xing)。林(lin)可(ke)霉(mei)素(su)可(ke)能(neng)導致(zhi)肝(gan)臟損害、過(guo)敏(min)反應(ying)和心(xin)血(xue)管反應(ying)，經 動物(wu)代謝后，可(ke)能(neng)殘(can)留(liu)于(yu)(yu)組織樣本(ben)(ben)中。 本(ben)(ben)試劑(ji)盒是應(ying)用 ELISA 技術研發的(de)藥物(wu)殘(can)留(liu)檢測產品(pin)， 與儀(yi)器分析技術相比(bi)具(ju)有(you)快速、簡便、準確和靈敏(min)度高等優點， 能(neng)限度地(di)減少(shao)工作強度和操作誤差。?
實驗原理?
本試劑盒采用間接(jie)競爭 ELISA 方法，在酶(mei)(mei)標板微孔條上 預包被林可(ke)霉素(su)抗原(yuan)(yuan)，樣(yang)本中林可(ke)霉素(su)和此抗原(yuan)(yuan)競爭林可(ke)霉素(su) 抗體（抗試劑），同時林可(ke)霉素(su)抗體與(yu)酶(mei)(mei)標二抗（酶(mei)(mei)標物(wu)）相(xiang) 結合，經 TMB 底物(wu)顯色，樣(yang)本的吸光度值與(yu)林可(ke)霉素(su)的含量 呈負(fu)相(xiang)關，與(yu)標準曲線比較(jiao)再乘以其對應(ying)的稀釋(shi)倍數，即可(ke)得(de) 出樣(yang)本中林可(ke)霉素(su)的含量。
適用范圍?
可定性、定量檢(jian)測(ce)畜禽(qin)、水產類(lei)動物(wu)組織中林可霉素的含(han)量。
樣本前處理步驟
請參考(kao)說(shuo)明書(shu)，不同樣本，步驟不同
檢測步驟?
1、將所需試劑(ji)從(cong)冷藏環境中取出，置于室溫(wen)（20~25℃）平 衡(heng) 30min 以上，注意每(mei)種液體試劑(ji)使用前均須搖勻。?
2、取出需要數量(liang)的微(wei)孔(kong)板，將不用的微(wei)孔(kong)板放(fang)進原錫箔袋中 并(bing)且與提(ti)供的干(gan)燥劑一起(qi)重新密封，保存于 2～8℃。切勿(wu) 冷(leng)凍。?
3、洗滌液(ye)在使用前也(ye)需回溫(wen)。?
4、編號(hao)：將樣(yang)本(ben)和(he)(he)標準品對(dui)應(ying)微(wei)孔按序編號(hao)，每個樣(yang)本(ben)和(he)(he)標 準品做 2 孔平行，并記錄標準孔和(he)(he)樣(yang)本(ben)孔所(suo)在的位置。?
5、加(jia)(jia)(jia)標(biao)準(zhun)品/樣本：加(jia)(jia)(jia)入(ru)(ru)標(biao)準(zhun)品或(huo)樣本 50μL 到對應(ying)的微(wei)孔中， 再加(jia)(jia)(jia)入(ru)(ru)林(lin)可(ke)霉素(su)酶標(biao)物(wu) 50μL/孔，最后(hou)加(jia)(jia)(jia)入(ru)(ru)林(lin)可(ke)霉素(su)抗試 劑(ji) 50μL/孔，輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)振蕩(dang)混(hun)勻，用蓋(gai)板膜(mo)蓋(gai)板后(hou)置于(yu) 25℃避 光環境中反應(ying) 30min。?
6、洗(xi)板(ban)(ban)：小心揭開(kai)蓋板(ban)(ban)膜，將孔內液體(ti)甩干，用洗(xi)滌(di)液 250μL/ 孔，充分洗(xi)滌(di) 4～5 次，每次間隔(ge) 10s，在吸水紙上拍(pai)干（拍(pai) 干后未(wei)被清(qing)除(chu)的氣(qi)泡可用未(wei)使用過的槍頭戳破）。?
7、顯色：加入底(di)物(wu)(wu)液 A 液 50μL/孔，再加入底(di)物(wu)(wu)液 B 液 50μL/ 孔，輕(qing)輕(qing)振蕩混(hun)勻，用蓋板膜蓋板后(hou)置于(yu) 25℃避光環境中 反應 15min。?
8、測(ce)定(ding)(ding)：加入(ru)終(zhong)止(zhi)液 50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設(she)定(ding)(ding)酶標儀(yi) 于 450nm 處(chu)（建議(yi)用雙波長 450/630nm 檢測(ce)，請在 5min 內讀完(wan)數據），測(ce)定(ding)(ding)每孔 OD 值(zhi) (若無酶標儀(yi)，則不加終(zhong) 止(zhi)液用目測(ce)法可進行判定(ding)(ding))。?
結果判定?
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