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地克珠利ELISA檢測試劑盒原理以及注意事項

2024-05-15 14:59瀏覽量:340

地克珠利ELISA檢測試劑盒是一種用于檢測地克珠利殘留量的試劑盒,采用了酶聯免疫吸附法(ELISA)原理。這種試劑盒具有特異性強、準確性高、快速簡便等優點,可定性、定量檢測動物雞肉、飼料樣本中地克珠利的含量


地克珠利是一種新型、高效、低毒的抗球蟲藥,廣泛用于雞球蟲病的治療。然而,由于其在動物體內的代謝和排泄,可能會對環境和人體健康造成潛在危害。因此,對地克珠利殘留量的檢測具有重要的意義。


地克珠利ELISA檢測試劑盒的操作步驟一般包括以下幾個步驟:

1、將所需試劑從冷藏環境中取出,置于室溫(20~25℃)平 衡 30min 以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?

2、取出需要數量的微孔板,將不用的微孔板放進原錫箔袋中 并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于 2~8℃。切勿 冷凍。?

3、洗滌液在使用前也需回溫。?

4、編號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標 準品做 2 孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。?

5、加標準品/樣本:加入標準品或樣本 50μL 到對應的微孔中, 再加入地克珠利酶標物 50μL/孔,再加入地克珠利抗試劑 50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于 25℃避光環境 中反應 30min。 6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內液體甩干,用洗滌液 250μL/ 孔,充分洗滌 4~5 次,每次間隔 10s,用吸水紙拍干(拍 干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。

7、顯色:加入底物液 A 液 50μL/孔,再加底物液 B 液 50μL/ 孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于 25℃避光環境中反應 15min。?

8、測定:加入終止液 50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設定酶標儀 于 450nm 處(建議用雙波長 450/630nm 檢測,請在 5min 內讀完數據),測定每孔 OD 值(若無酶標儀,則不加終 止液用目測法可進行判定)


地克珠利ELISA檢測試劑盒在使用時需要注意以下事項:

  1. 嚴格遵循說明書:務必按照試劑盒附帶的說明書嚴格操作,不得隨意更改實驗步驟和條件。

  2. 樣本準備:樣本采集和處理應按照說明書規定進行,確保樣本的新鮮、無污染,并避免反復凍融。

  3. 試劑保存:所有試劑在使用前都應達到室溫,并避免陽光直射和高溫。未使用的試劑應存放在推薦的溫度下,并遵循保存期限。

  4. 操作時間:注意加樣和孵育的時間,過長或過短的時間都可能影響檢測結果的準確性。

  5. 加樣準確性:使用加樣器時要準確、迅速,避免加樣過程中的交叉污染和氣泡產生。

  6. 洗滌步驟:洗滌過程應充分且徹底,避免未結合的試劑殘留在微孔板上,影響實驗結果。

  7. 顯色與測定:顯色劑應在臨用前配制,并避免長時間暴露于空氣中。測定時應使用酶標儀,確保讀數準確。

  8. 安全防護:地克珠利可能對人體健康有潛在影響,因此操作時應佩戴手套、護目鏡等防護設備,避免直接接觸試劑。

  9. 廢物處理:實驗后產生的廢棄物應按照實驗室廢棄物處理規定進行妥善處理,避免對環境造成污染。

  10. 質量控制:每次實驗都應包括質控品,以監測實驗的準確性和可靠性。

  11. 記錄與解讀:實驗過程中應詳細記錄每一步驟和結果,以便后續分析和解讀。解讀結果時應結合質控品的結果進行綜合考慮。