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菌落總數檢測的具體步驟
2025-07-31 16:17瀏覽量：700
1.準備和個人防護?：實驗人員穿戴實驗服、口罩和手套，使用酒精棉球擦拭操作臺和手套區域，并點燃酒精燈確保無菌環境。樣品前處理包括稱量25克固體或半固體樣品，加入225mL無菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液，拍打均質2分鐘制成初始稀釋液 ?。
2.?樣品稀釋和接種?：將稀釋液充分震蕩均勻，使用移液槍吸取1mL樣品勻液；對于液體樣品，可吸取25mL加入225mL稀釋液制成1:10勻液，再通過梯度稀釋（如1:100）制成不同濃度稀釋液 。吸取稀釋液垂直滴加在菌落總數測試片中央區域的培養基上，避免氣泡產生，使用壓板器輕輕壓下使樣液均勻分布，靜置至少2分鐘待吸收。
3.?培養過程?：將測試片透明面向上正置于培養箱中，設置溫度36±1℃，培養24~48小時；水產品樣品需調整至30±1℃培養48~72小時，測試片堆疊不超過20片以防止重疊影響結果 ?。
4.?結果計數和計算?：培養后，細菌生長顯示紅色菌落，使用目視或菌落計數器在30-300CFU范圍內計數；微小菌落計入，彌散菌落計為一個系統，計數困難時可選擇代表性小方格計算平均后乘以20估算。基于稀釋倍數和菌落數計算菌落總數，優先選用菌落數在適宜范圍的平板，并通過標準公式加權平均報告結果。
注意事項：避免測試片長時間暴露于紫外光或熒光燈下，使用后需高壓滅菌處理；測試片出現少量黑點或氣泡為正常現象，不影響檢測。
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