NEWS
新聞資訊
作為焦點的“致瀉大腸埃希氏菌”，究竟該如何檢測？
2021-12-03 16:35瀏覽量：930
GB29921-2021《食品安全國家標準 預包裝食品中致病菌限量》于2021年9月7日發布，2021年11月22日實施。“致瀉大腸埃希氏菌”突然就成了焦點！
在2013版本中，原檢測項目為大腸埃希氏菌O157:H7/NM。然而隨著對致瀉大腸埃希氏菌檢驗、鑒定能力的提升，越來越多的由其引起的暴發和病例被識別出來，其導致的疾病負擔以往也可能被低估。我國食源性疾病監測結果顯示，近幾年細菌性食源性疾病暴發事件中，致瀉大腸埃希氏菌引起的事件數已經上升到第五位，高危食品主要為肉制品、蔬菜、水果等。
2021版標準修訂將“大腸埃希氏菌O157:H7”修改為“致瀉大腸埃希氏菌”，并對肉制品中的牛肉制品、即食生肉制品、發酵肉制品類，即食果蔬制品中的去皮或預切的水果、去皮或預切的蔬菜及上述類別混合食品規定了限量要求n=5，c=0，m=0/25g。
（來源：食品安全國家標準數據檢索平臺）
致瀉大腸埃希氏菌是什么？
致瀉大腸埃希氏菌是一類能引起人體以腹瀉為主的大腸埃希氏菌，可經過污染食物引起人類發病。常見的致瀉大腸埃希氏菌主要包括：
腸道致病性大腸埃希氏菌EPEC
腸道侵襲性大腸埃希氏菌EIEC
產腸毒素大腸埃希氏菌ETEC
產志賀毒素大腸埃希氏菌STEC（包括腸道出血性大腸埃希氏菌EHEC）
腸道集聚性大腸埃希氏菌EAEC
致瀉大腸埃希氏菌如何檢測？
GB4789.6-2016致瀉大腸埃希氏菌檢驗流程：
目前國標PCR確認試驗方法為普通PCR法。
接下來帶大家了解一下美正的兩種PCR檢測方案>>
1. 普通PCR檢測流程及產品介紹
2. 熒光定量PCR檢測流程及產品介紹
致瀉大腸埃希氏菌檢測注意事項及常見問題>>
操作注意事項??
（1）PCR鑒定前需將菌純化于非選擇性的固體培養基上；
（2）所有PCR操作需嚴格分區，不同區域內儀器物品不可混用；
（3）所有冷凍試劑使用前需融化混勻短暫離心后開蓋使用；
（4）試劑避免反復凍融，大體積試劑可配置后小體積分裝冷凍；
（5）操作需要帶手套，不可使用帶熒光物質或者是帶粉末的手套；
（6）提核酸加熱后需冷卻到室溫后在開蓋操作，避免氣溶膠污染；
（7）PCR管及管蓋上不可使用記號筆標記；
（8）不同批次試劑盒試劑不可混用；
（9）嚴格按照試劑盒說明書設定反應參數和熒光通道。
? 用熒光定量PCR符合標準要求嗎？??
答：這個不好說，一般按照不同的評審員的理解來要求。多數評審員應該會算是一種方法偏離吧。但是熒光定量PCR在技術上肯定是更先進的，至少明顯降低了污染風險和生物安全風險，是今后食品微生物學檢驗技術的發展方向。GB 4789.6－2016的6.5.8條款：如用商品化PCR試劑盒或多重聚合酶鏈反應（MPCR）試劑盒，應按照試劑盒說明書進行操作和結果判定。這時候，我使用商品化熒光定量PCR試劑盒，是不是就可以按照試劑盒說明書進行了？大家可以探討一下。
現在的食品實驗室是否可以通過改裝成分子實驗室？食品檢測的BSL-II室可以和PCR實驗室共用嗎？??
答：食品實驗室本來就可以包括分子實驗部分。所以，常規食品微生物檢測的生物安全二級實驗室可以和PCR實驗室共用。但是，因為生物安全二級實驗室必須是負壓或者常壓，而PCR實驗室是相對正壓，還有人流物流的多次進進出出，在防止交叉污染方面比較辛苦。最好還是不要合并使用。
美正可提供“致瀉大腸埃希氏菌”從前處理及增菌培養到PCR確認試驗整體解決方案，并提供全程技術支持培訓服務。
